基于PCR-DGGE的咖啡湿法发酵酵母菌的分离鉴定

摘要

为了更全面系统的反映出咖啡发酵体系中的原始状态,分别对发酵堆的上部、中部、下部以及混合样品(上、中、下的混合)进行采集,并对发酵堆这3部分的温度进行了测定,同时采用了7种培养基,分别对上、中、下以及混合样进行酵母菌的培养、分离、纯化及鉴定。之后通过PCR-DGGE方法确定了酵母的优势菌种。结果发现发酵堆的上部、中部和下部的温差很小,随着发酵的进行,整体变化不大,基本保持在20℃左右,且出现了大量产果胶酶的酵母菌,包括异常毕赤酵母Pichia anomala,毕赤克鲁维酵母P.kluyveri,葡萄汁有孢汉生酵母Hanseniaspora uvarum等。其中,毕赤克鲁维酵母P.kluyveri,葡萄汁有孢汉生酵母H.uvarum为优势菌种,并对其在发酵过程中所起的作用进行了深入剖析,这些酵母菌在咖啡湿法发酵中起到了关键的作用。