三阴乳腺癌患者血液外泌体miRNA-27a/P-gp在新辅助化疗后的变化及其对血管新生的影响

摘要

目的 研究新辅助化疗(NACT)前后三阴乳腺癌(TNBC)患者血液外泌体中miR-27a/P-gp对血管新生的调节机制.方法 分离并鉴定NACT组与对照组(单独表柔比星治疗)TNBC患者血液外泌体.RT-qPCR法检测血液外泌体中miR-27a/P-gp的表达量.荧光素酶报告基因实验研究miR-27a/P-gp的关系.低表达miR-27a的外泌体(EXO-miR-27a-)、高表达miR-27a的外泌体(EXO-miR-27a+)、miR-27a拟似物(miR-27a-mimic)和阴性对照(mimic-NC)、P-gp过表达质粒(pcDNA3.1-P-gp)及相应的对照物(pcDNA3.1-null)分别处理人微血管内皮细胞(HMVEC).ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)水平,蛋白免疫印迹法检测VEGF-A的表达,小管形成实验评估血管生成能力.结果 与对照组比较,NACT组的血液和外泌体中miR-27a的表达下调,P-gp表达上调(P<0.05);与治疗前比较,NACT组治疗后的血液和外泌体中miR-27a表达下调,而P-gp的表达上调(P<0.05);HMVEC细胞中,EXO-miR-27a+组的VEGF水平和血管生成能力较EXO-miR-27a-组增加(P<0.05).miR-27a-mimic组的VEGF水平和血管生成能力较mimic-NC组增加(P<0.05).miR-27a靶向抑制P-gp.pcDNA3.1-P-gp组VEGF水平和血管生成能力较pcDNA3.1-null组降低(P<0.05).pcDNA3.1-P-gp+miR-27a-mimic组VEGF水平和血管生成能力较pcDNA3.1-null+miR-27a-mimic组降低(P<0.05).结论 NACT治疗TNBC患者后外泌体miR-27a下调,而P-gp上调,miR-27a通过抑制P-gp促进血管新生.