人白细胞介素10(hIL10)在毕赤酵母中的表达

摘要

利用PCR技术从质粒pcDNA3.1/GS扩增得到hIL10基因.将其插入含有AOX1启动子和α分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K/IL10,转化毕赤酵母GS115,筛选出整合了多拷贝白细胞介素10基因的菌株,经摇瓶培养,0.5%甲醇诱导表达.SDS PAGE分析显示,表达产物以可溶性分子形式存在于上清中,诱导4d的表达量达到高峰.Western印迹表明,表达产物具有良好的抗原性和特异性.