常染色体显性多囊肾疾病行胚胎植入前遗传学诊断的实验研究

摘要

目的:建立由PKD1突变所致常染色体显性多囊肾疾病(autosomal dominant polycystic kidneydisease,ADPKD)的胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)方法。方法:①通过微卫星连锁分析确定2个多囊肾家系的ADPKD致病基因。检测的微卫星包括为与PKD1连锁的KG8、SM6、CW4和CW2以及与PKD2连锁的D4S1534、D4S1563、D4S414和D4S423。②对18个淋巴细胞和1个PKD1突变所致ADPKD成员行常规体外受精胚胎移植后的5个废弃胚胎15个卵裂球行多重巢式PCR和毛细管电泳检测与PKD1连锁的微卫星分型。结果:①KG8、CW4和CW2可作为连锁微卫星分析外周血和单个细胞的PKD1突变;②2个家系的致病基因均为PKD1;③单个卵裂球扩增成功率为86.67%(13/15),单个淋巴细胞扩增成功率为88.89%(16/18),CW4等位基因脱扣率为25%(4/16),CW2未发现等位基因脱扣,均未发现污染,2个胚胎携带致病基因。结论:PKD1连锁的微卫星分型可作为PKD1突变所致ADPKD的PGD诊断方法。