枯草芽孢杆菌HAB-1产生抗菌物质的最优发酵条件

摘要

为筛选适合Bacillus subtilis HAB-1生长和抑菌物质产生的最佳培养基和最佳培养条件,采用摇瓶培养法和平板对峙法,通过单因子试验筛选适合菌株HAB-1生长的碳源、氮源、金属离子及最佳培养条件.结果表明,经摇瓶发酵培养筛选到适合菌株HAB-1生长及其拮抗物质产生的最佳碳源为蔗糖和玉米粉,最佳氮源为酵母粉和麸皮,最佳金属离子是K+.用正交试验法确定了使HAB-1具有较强抗菌活性的最优培养基为ZY,其各组分的质量浓度为:蔗糖10g·L-1,玉米粉30 g·L-1,酵母粉30 g·L-1,麸皮40 g·L-1,KH2PO41 g·L-1；在确定适合该菌株的培养基组分基础上,对其培养条件进行优化试验,结果表明,初始pH为6.0,培养温度为37℃,250 mL摇瓶装液量为60mL,接种量的体积分数为2％,培养时间为24h,转速为190r·min-1时为该菌株的最佳培养条件,获得菌株HAB-1活菌数最多且对橡胶树炭疽菌的抑菌活性最强,活菌数和抑菌直径分别为2.6×1010·mL-1和34.0 mm,较NB培养的HAB-1提高了123.81倍和1.10倍.