三磷酸腺苷对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响及机制研究

摘要

目的探讨三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的影响及其作用机制。方法取4~5周龄SD大鼠的BMSCs,体外培养至第3代。以PNPP法检测不同浓度ATP(150μmol/L、300μmol/L、600μmol/L)及BBG(P2X7受体抑制剂)对BMSCs碱性磷酸酶表达的影响。采用RT-PCR和real time PCR法检测ATP及BBG对BMSCs多个成软骨诱导指标mRNA表达的影响。结果加入ATP后,BMSCs碱性磷酸酶表达明显增加(P<0.05),其中ATP浓度为150μmol/L和300μmol/L时碱性磷酸酶表达量最高(P<0.05);多个成软骨指标,如SOX6、SOX9及COL2A1等的表达水平提高(P<0.05);加入P2X7受体抑制剂后,ATP对碱性磷酸酶的促进作用降低(P<0.05),成软骨指标SOX6、SOX9及COL2A1等的表达亦明显减少(P<0.05)。结论一定浓度的ATP对BMSCs向软骨细胞分化具有促进作用,可能是通过介导P2X7受体而发挥作用。