小鼠胚胎干细胞体外分化为肝细胞的实验研究

摘要

[目的]探讨小鼠胚胎干细胞(ESCs)分化为肝细胞的条件,为肝细胞移植寻找新的细胞来源.[方法]采用半固体培养D3胚胎干细胞系,形成胚胎体,加入或不加入细胞因子,在不同的时间点采用PCR方法对肝细胞的特异性蛋白甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)进行检测.[结果]小鼠胚胎干细胞在小鼠白血病抑制因子(LIF)存在的情况下保持未分化生长状态,不表达肝细胞的特异性基因AFP和ALB,撤去LIF后在半固体培养基中很快发育为胚胎体并继续分化.分化8 d的胚胎体可以检测到AFP mRNA的表达,且其在8～18 d的胚胎体中表达逐渐增加.16 d的胚胎体开始检测到ALB mRNA的表达,它也表达在18 d的胚胎体,成纤维细胞生长因子(aFGF、bFGF)、肝细胞生长因子(HGF)和神经生长因子(NGF)对胚胎干细胞向肝细胞分化在此培养体系中没有作用.[结论]胚胎干细胞经过胚胎体发育阶段,可分化为肝细胞,细胞因子aFGF、bFGF、HGF和NGF生长因子在此体系中无明显的作用.