白蛋白对近端肾小管上皮细胞增殖与凋亡的影响

摘要

【目的】探讨白蛋白对近端肾小管上皮细胞(PTCs)增殖与凋亡的影响。【方法】用不同剂量(0.1,0.5,1,5,10,30mg/mL)去脂牛血清白蛋白(dBSA)超载体外培养的NRK52E,dBSA0mg/mL作为对照。细胞增殖活性用MTS比色法检测和显微镜观察。细胞凋亡检测:荧光染料DAPI染核,DNA梯带实验,原位末端标记(TUNEL)实验和苔盼蓝染色计数。【结果】高剂量dBSA超载未完全融合NRK52E细胞144h后细胞变得更密集。MTS比色结果发现,高剂量dBSA(5、10、30mg/mL)超载可明显诱导NRK52E细胞增殖,增殖活性分别为(0.700±0.045)A、(1.021±0.029)A和(1.273±0.173)A,较对照细胞(0.441±0.020)A显著升高,P均<0.05。高剂量dBSA超载的NRK52E细胞,有较多出现核碎裂和核固缩,有较强DNA梯带和原位末端标记信号。苔盼蓝染色计数发现,高剂量dBSA(5、10、30mg/mL)超载NRK52E细胞72h的死亡细胞数[(680000±28618)/mL,(970000±52915)/mL和(1132500±88954)/mL较对照的死亡细胞数[(312500±28395)/mL]显著升高,P均<0.05;而且死亡细胞数呈剂量依赖性。【结论】白蛋白超载NRK52E细胞既可诱导细胞增殖,又可诱导细胞凋亡。