DNMT3B通过Hippo信号通路促进肝癌细胞的增殖与侵袭

摘要

cqvip:目的探索DNMT3B对肝癌细胞的增殖与侵袭的影响。方法收集2008年5月~2013年5月在重庆医科大学附二院确诊的175例肝癌患者并制作成组织芯片,分析DNMT3B蛋白表达水平的差异与患者的预后情况及患者肿瘤无瘤生存率与肿瘤特异性生存率的关系。使用单因数与多因素Cox回归分析DNMT3B的表达对肝癌患者预后的影响。使用小干扰RNA(siRNA)与慢病毒过表达干扰DNMT3B的表达,利用CCK-8及EDU染色检测肝癌细胞增殖情况,对细胞进行Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力分析。结果免疫组化显示DNMT3B蛋白在肝癌中的表达率(67.4%)高于配对癌旁组织的表达率(41.1%)。DNMT3B的高表达与肿瘤大小(P=0.001)、血管侵犯(P=0.004)、肝内转移(P=0.018)密切相关。DNMT3B高表达患者其肿瘤无瘤生存率与肿瘤特异性生存率低于DNMT3B低表达患者(P<0.005)。沉默DNMT3B显著抑制Huh-7细胞增殖,Transwell实验检测结果表明,与对照组相比沉默DNMT3B抑制Huh-7细胞的迁移与侵袭能力。Western blot检测显示,沉默DNMT3B的表达升高了LATS1的表达水平,降低了YAP1的表达,激活了Hippo信号通路。同时,甲基化特异性PCR显示LATS1的甲基化水平降低。结论肝癌中DNMT3B的表达高于癌旁组织,并且DNMT3B的高表达与患者的低生存率密切相关。沉默DNMT3B抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力。DNMT3B主要通过甲基化LATS1并抑制其表达,促进癌基因YAP1的表达进而抑制Hippo信号通路的抑癌作用,从而促进肝癌恶性发展。