香蕉ISSR反应体系的建立

摘要

以35份香蕉品种为材料,采用正交设计L_(25)(5~6)对PCR反应中的DNA质量浓度、Taq DNA聚合酶用量、Mg~(2+)浓度、引物浓度、退火温度及甲酰胺浓度等6个因素在5个水平上进行了优化试验.建立了稳定的、可重复的香蕉ISSR最佳反应体系和PCR 扩增参数.确定在25 μL的反应体系中,DNA模板质量浓度为0.8 ng/μL,Mg~(2+)浓度为1.5 mmol/L,dNTPs浓度为0.3 mmol/L,引物浓度为0.2 μmol/L,Taq酶为1.25 U,退火温度为52 ℃.