家兔卵巢组织玻璃化冷冻保存的实验研究

摘要

目的 采用直接覆盖玻璃化冷冻(DCV法)和半麦管法玻璃化冷冻(HS法)处理家兔卵巢组织,探讨两种冷冻方法对卵泡组织形态学及超微结构的影响.方法 将10只健康雌性新西兰家兔的卵巢组织块随机分配组成新鲜对照组、DCV法和HS法玻璃化冷冻组3个实验组,观察和比较各组间卵巢内卵泡的组织形态学和超微结构变化.结果 (1)与对照组卵巢组织中的原始卵泡及初级卵泡的形态正常率(分别为88.11％和72.86％)相比,冷冻复苏后的原始卵泡及初级卵泡形态正常率在DCV法(分别为72.66％和55.08％)和HS法(分别为71.73％和56.18％)均显著降低(P＜0.05),且初级卵泡的形态正常率均显著低于原始卵泡(P＜0.05),但两个冷冻组间无显著差异(P＞0.05);(2)观察卵泡超微结构的改变:两种玻璃化冷冻法主要损伤的是细胞浆中的线粒体,细胞核也会出现核固缩现象.结论 DCV法和HS法玻璃化冷冻均能保存家兔卵巢组织内的卵泡,但冷冻所导致的原始卵泡和初级卵泡损伤仍不可避免,其中初级卵泡损伤更明显.这两种冷冻法处理后的卵泡组织形态学无显著性变化,但在一定程度上会损伤卵泡中各组成部分的细胞超微结构.