乳腺特异表达载体缺失片段的鉴定与修复

摘要

通过对pBC1中的乳腺特异表达启动子成分进行分析,鉴定了位于β酪蛋白启动子上游两个EcoR Ⅰ 位点(-89～-94和-120～-125)之间的缺失片段,31bp的缺失使得该载体中的一个乳控盒元件(-112～-141)和一个乳腺因子识别序列(-92～-102)遭到破坏,并使得位于TATA框上游的所有启动子成分发生了位置改变.通过与山羊β酪蛋白启动子序列进行比较,设计并合成了缺失片段,经一系列的酶切和连接处理,使得该缺失得到了修复,修复后的载体具有所有乳蛋白表达需要的启动子调控原件.本试验结果为利用修复后的乳腺特异高效表达载体进行乳腺生物反应器的研究奠定了分子生物学基础.