肺瘤平膏联合环磷酰胺化疗对肺癌的抑瘤作用和酸性微环境的影响

摘要

目的:观察肺瘤平膏和化疗药环磷酰胺对肺癌小鼠的作用,并从酸性微环境和细胞凋亡角度探索其内在作用机制。方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,分别给予环磷酰胺、肺瘤平膏、环磷酰胺+肺瘤平膏相应处理,以生理盐水组作为对照,观察各组小鼠的肿瘤体积、肿瘤增殖率、食物消耗量。给药15 d后处死小鼠,取肿瘤组织,用乳酸试剂盒检测肿瘤组织的乳酸相对浓度,免疫组织化学法检测葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)、己糖激酶1(hexokinase 1,HK1)、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、碳酸酐酶-Ⅸ(carbonic anhydrase-Ⅸ,CA-Ⅸ)的蛋白表达,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率和调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比例,Wes-tern blot法检测缺氧诱导因子1-α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、Bcl-2、Bax、Caspase-3、白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)的蛋白表达。结果:肺瘤平膏+环磷酰胺组小鼠的肿瘤生长受到抑制最为明显,肿瘤增殖率最低,与生理盐水组相比差异有统计学意义(P0.05)。进一步的分子生物学检测发现,肺瘤平膏+环磷酰胺组肿瘤组织的乳酸水平在各组中最低,并伴有GLUT4、HK1、GRP78、CA-Ⅸ等蛋白表达和Treg细胞比例的下降,与生理盐水组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,与生理盐水组相比,肺瘤平膏+环磷酰胺组肿瘤细胞凋亡显著增加,而HIF-1α、Bcl-2、Bax、Caspase-3、IL-2等蛋白的表达与生理盐水组相比存在明显差异。结论:化疗药环磷酰胺与肺瘤平膏在抑制肺癌生长、提高荷瘤小鼠一般状况上具有协同作用,这些作用部分是因为二者联用改善组织缺氧,抑制HIF-1α表达,进而调控下游GLUT4、HK1、GRP78、CA-Ⅸ等蛋白的表达,降低肿瘤组织局部的乳酸水平,改善肿瘤组织酸性微环境,从而诱导肿瘤细胞凋亡,抑制T细胞向Treg细胞分化。