人类新基因RNF122的克隆、表达和亚细胞定位

摘要

目的:克隆了一个未知功能的人类新基因RNF122,分析了它的表达谱和细胞定位,为其功能研究提供基础.方法:利用Refseq数据库的序列资料,从人混合组织文库中通过PCR和DNA测序克隆了全长的RNF122,通过生物信息学分析RNF122的结构特性.用Northern blot,RT-PCR等方法研究了RNF122在正常组织、肿瘤组织、细胞系中的表达情况.应用共聚焦显微镜分析了它在细胞中的亚细胞定位.结果:获得RNF122全长编码区序列,并构建了绿色荧光蛋白表达质粒.生物信息学分析显示RNF122编码的蛋白中有一个典型的RING结构域.Northern blot和RT-PCR证明RNF122在多种正常组织、肿瘤组织和细胞系中都有表达.激光共聚焦显微镜提示RNF122编码蛋白在细胞中定位于高尔基体和内质网.结论:RNF122是一个新的编码含有RING结构域的新基因,它广泛表达于多种组织和细胞系,它编码的蛋白产物定位于高尔基体和内质网中,其可能参与了细胞内蛋白的降解过程.