二氢鞘氨醇联合佛波酯增强NB4细胞中miRNA-21的表达

摘要

为了研究二氢鞘氨醇(Sphingonine,SA)和佛波酯(12-O-Tetradecanoylphorbol 13-acetate,TPA)联合使用后对人早幼粒白血病细胞NB4的生物学影响,利用四唑盐(3-(4,5-Dimethylthiahiazol-2-yl)-2,5-diphenytetrazolium bromide,MTT)比色法、流式细胞术和实时定量PCR等方法检测了细胞形态、生长凋亡和肿瘤相关基因miRNA-21的表达变化情况.结果显示,SA 2.15 mmol·L-1 +TPA 10 nmol·L-1联合用药组与TPA 10 nmol·L-1单独处理组相比,细胞出现体积变小、膜皱缩和出芽等明显凋亡特征;SA 2.15 mmol· L-1 +TPA 10 nmol·L-1联合用药组细胞生长抑制率和凋亡率均明显高于SA或TPA单药组(P＜0.05);miRNA-21成熟体和初级转录本的表达在SA 2.15 mmol·L-1+TPA10 nmol·L-1联合用药组均比SA或TPA单药组高2～4倍(P＜0.05).结果表明SA联合TPA能显著增强抗白血病效应,其作用机制与miRNA-21的诱导表达相关.