东方百合‘口索邦’基于喷雾式植物反应器的AtCKX3基因转化

摘要

以东方百合‘索邦’鳞片为试材,采用喷雾式植物反应器(即开放式培养)手段,进行外源基因AtCKX3的转化,并对除草剂草丁膦(PPT)质量浓度筛选、转化效率进行了研究.以生长情况一致的百合幼苗为材料进行草丁膦质量浓度的筛选,结果表明:8.5 mg·L-1为‘索邦’草丁膦筛选的临界质量浓度;将农杆菌侵染后的鳞片在喷雾式反应器中培养,诱导出不定芽及生根后进行移栽,并对转化植株幼苗进行草丁膦筛选.对抗性植株进一步进行PCR检测和PCR-Southern杂交检测,结果表明:采用喷雾式植物反应器培养,一方面,可有效提高转化效率,缩短培养时间,转化率为0.29％左右;另一方面转化苗移栽成活率更高,达75％.