温敏性水凝胶抑制间充质干细胞凋亡并促进旁分泌及过表达FTH的细胞MRI的实验研究

摘要

目的 探讨过表达铁蛋白重链(FTH)的间充质干细胞(UE7T-13)进行体外MRI的可行性,并验证温敏性水凝胶HA-F127复合UE7T-13是否可抑制其凋亡、促进细胞因子分泌.方法 构建携带FTH-绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体并感染UE7T-13,检测感染后的GFP阳性率及FTH表达水平.同时,HA-F127复合FTH/UE7T-13,细胞计数试剂盒(CCK8法)检测FTH慢病毒载体感染后和(或)水凝胶复合后的UE7T-13细胞增殖能力,并进行HA-F127复合FTH/UE7T-13的MRI.检测HA-F127复合对过氧化氢(H2O2)诱导UE7T-13细胞凋亡的影响,ELISA检测IL-10、HGF含量.结果 FTH-GFP慢病毒载体可成功感染UE7T-13,48 h荧光显微镜观察GFP表达率几乎100％,FTH mRNA表达提高了3倍,FTH蛋白可随着时间延长表达增多并至5 d仍稳定高效表达.FTH感染或HA-F127复合均不影响UE7T-13增殖能力,不影响骨髓间充质干细胞的体外MRI.HA-F127复合UE7T-13可抑制H2O2介导的细胞凋亡,并促进IL-10、HGF细胞因子分泌.结论 过表达FTH实现UE7T-13的MRI示踪功能,温敏性水凝胶HA-F127可在过氧化损伤环境下抑制FTH/UE7T-13的凋亡,并促进其分泌IL-10、HGF,可为下一步实验奠定基础.