流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群培养方案的研究

摘要

目的 改进流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群的刺激培养方案.方法 外周全血经RPMI1640培养液和终浓度为25μg/L的PMA、1 mg/L的Ionomycin、20μg/的Monensin培养2 h后,用流式细胞仪分别检测CD4、CD69阳性细胞及CD3阳性细胞表达IFN-γ和IL-4的比例.同时检测培养前CD4阳性细胞及培养4 h后CD3阳性细胞表达IFN-γ和IL-4的比例.结果 淋巴细胞门中CD4+细胞与CD4-细胞能明显区分,培养前与培养2 h后CD4+细胞比例差异无显著性(P＞0.05);T淋巴细胞中90%以上表达CD69;刺激培养2 h和4 h后CD3+细胞表达IFN-γ和IL-4的比例差异无显著性(P＞0.05).结论 该实验确定的培养方案能满足流式细胞术CD4、IFN-γ、IL-4三色法检测Th细胞亚群的培养要求.