高迁移率族蛋白B1单克隆抗体制备与竞争ELISA测定法的建立

摘要

目的 制备高迁移率族蛋白B1(HMGB1)单克隆抗体和建立HMGB1的直接竞争ELISA测定方法.方法 采用PEG细胞融合技术、有限稀释法和间接ELISA法制备和筛选杂交瘤细胞.直接竞争ELISA法测定大鼠血清HMGB1水平.结果 共获得7株HMGB1特异性杂交瘤细胞株.建立的直接竞争ELISA方法的测定范围为1～320 ng/ml,回收率为97%～106%,变异系数为2.6%～7.3%.用该方法测定大鼠血清HMGB1水平发现,糖尿病大鼠模型HMGB1水平高于正常大鼠(P＜0.001).结论 直接竞争ELISA可用于HMGB1的测定,该方法较双抗体夹心ELISA法更简便、快速.