苦参素对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞线粒体保护作用的研究

摘要

目的 探索苦参素(OMT)对缺氧/复氧(H/R)所致乳鼠心肌细胞线粒体损伤的保护作用及其机制.方法 分离并体外培养乳鼠心肌细胞3天后制备H/R损伤细胞模型,设正常对照组、H/R组和OMT低、中、高剂量(20、40、80μg/ml)组,各组于造模前30min给药处理.复氧2h后提取线粒体,比色法检测线粒体呼吸酶[NADH脱氢酶(ND)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)]活性、ATP含量和Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力,检测游离Ca2+浓度;荧光法检测膜电位(△ψm)和膜通透性转换孔(MPTP)开放度,透射电子显微镜(TEM)观察线粒体超微结构变化;生化分析法检测MDA含量和SOD、CAT活力.结果 与H/R组比较,OMT中、高剂量组线粒体ND、SDH、CCO活性和ATP含量显著升高(P<0.05);Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力显著升高且游离Ca2+浓度显著降低(P<0.05);△ψm显著升高、MPTP开放度显著降低(P<0.01);线粒体膜破裂、脊溶解断裂等超微结构病变明显改善;线粒体MDA含量显著降低且SOD、CAT活力显著升高(P<0.05).结论 OMT对H/R所致乳鼠心肌细胞线粒体结构和功能损伤具有一定的保护作用,作用机制可能与抑制线粒体Ca2+超载、抑制氧化应激和维持膜稳定性有关.