紫杉醇靶向Hippo信号通路抑制食管鳞癌干细胞干性的机制研究

摘要

目的探究紫杉醇靶向Hippo信号通路抑制食管鳞癌干细胞干性的作用机制。方法流式细胞术分离TE-13细胞系中侧群细胞,特异性筛选分离食管鳞癌干细胞(ESCC-CSCs),经免疫荧光鉴定后将细胞分为对照组及实验组,对照组细胞不做任何处理,实验组细胞给予1.25μg/ml紫杉醇。CCK-8、克隆形成检测细胞体外增殖活力的变化,成球实验检测细胞自我复制及更新能力的变化,QRT-PCR检测细胞内相关分子mRNA表达变化,Western blot法检测细胞内相关蛋白表达变化。结果TE-13细胞中分选得到29.3%ESCC-CSCs细胞,给予紫杉醇诱导后,细胞体外增殖能力受到显著抑制(P=0.000),克隆形成数量显著少于对照组(P<0.01),成球实验结果表明实验组体外成球个数及球体直径与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);Western blot法检测结果表明,紫杉醇治疗后ESCC-CSCs细胞内TAZ、CD44、SOX2蛋白表达降低,p-TAZ蛋白含量升高,与对照组比较,差异有统计学意义;qRT-PCR结果显示实验组细胞内CD44、SOX2 mRNA表达降低,而TAZ mRNA表达与对照组比较,差异无统计学意义。结论紫杉醇可靶向Hippo信号通路中TAZ、SOX2、CD44等关键分子参与调控ESCC-CSCs细胞干性。