黑水虻抗菌肽分离纯化及活性组分对HCT-8细胞的增殖抑制作用

摘要

目的黑水虻抗菌肽抗癌效应的研究鲜见。文章旨在探讨黑水虻抗菌肽活性组分对敏感肿瘤细胞株(HCT-8)体外增殖的影响,探索其可能的抑癌机制。方法采用RP-HPLC分离纯化黑水虻抗菌肽粗提物,抑菌实验筛选活性组分;酶标仪测定抗菌肽活性组分对豚鼠正常红细胞的溶血性;CCK-8法测定抗菌肽活性组分对敏感肿瘤细胞株(HCT-8)和正常人胚肾细胞(HEK293)的增殖抑制作用;流式细胞仪检测抗菌肽活性组分对HCT-8细胞周期的影响。结果分离纯化并通过抑菌实验筛选获得高活性组分抗菌肽HI-3,其对正常红细胞不溶血。抗菌肽HI-3对HCT-8细胞的增殖抑制作用具有明显的浓度依赖性,抑制率随处理浓度增加而增大,浓度在400μg/mL时抑制率最大,为60.11%±0.75%,显著高于其他处理组细胞的抑制率(P<0.01),且对正常HEK293细胞无明显影响。随着HI-3处理浓度增加,G0/G1期的HCT-8细胞明显增加,G2/M期的HCT-8细胞明显下降,变化呈浓度依赖性,而S期的变化呈现先增加后下降的变化趋势。结论黑水虻抗菌肽活性组分HI-3可显著抑制HCT-8细胞的增殖,且对正常细胞无不良影响;可能是通过阻滞HCT-8细胞周期于G0/G1期或S期,从而影响细胞增殖,具体作用机制有待进一步研究。