曲古抑菌素A抑制胃癌细胞增殖的分子机制

摘要

目的曲古抑菌素A(TSA)是氧肟酸盐类组蛋白去乙酰化酶抑制剂,具有一定的抗肿瘤活性。文中主要探讨胃癌细胞中TSA通过p-AKT/p-mTOR途径抑制细胞增殖的分子机制。方法分别用不同浓度的TSA处理胃癌细胞SGC-7901,通过MTT实验检测TSA对细胞的抑制率。将细胞分为对照组(不做任何处理)、TSA处理组(200 ng/mL TSA)、p-AKT回补组(200 ng/mL TSA+8μg/mL SC79)和自噬抑制组(5 mmol/mL 3-甲基腺嘌呤+200 ng/mL TSA)。通过细胞免疫荧光染色检测对照组和TSA处理组内Lc3的蛋白表达分布。Western blot检测对照组、TSA处理组和p-AKT回补组中p-AKT、p-mTOR以及自噬相关蛋白Lc3、P62的相对表达水平。EdU和细胞计数实验检测对照组、TSA组、p-AKT回补组和自噬抑制组中细胞的增殖能力。结果处理24 h,TSA处理组Lc3在细胞质内形成大量颗粒状聚集物,荧光分布从初始的弥散状转变为致密状。EdU实验显示,与对照组相比,TSA处理组的绿色荧光显著减少。对照组、TSA处理组、自噬抑制组p-AKT的表达量分别为1.78±0.19、0.92±0.03和1.71±0.19,Lc3分别为0.21±0.01、0.79±0.06和0.55±0.10,与对照组相比,TSA处理组中p-AKT相对表达水平均降低,Lc3表达升高(P<0.05)。3组p-mTOR分别为0.80±0.16、0.45±0.04和0.98±0.16,与对照组相比,TSA处理组中p-mTOR相对表达水平均降低(P<0.05)。3组P62分别为1.17±0.15、0.48±0.08和0.77±0.10,与对照组相比,TSA处理组中P62相对表达水平均降低(P<0.05)。与TSA处理组比较,p-AKT回补组p-AKT、p-mTOR、P62表达升高(P<0.05),Lc3表达降低(P<0.05)。与对照组相比,TSA处理组的细胞生长曲线抑制效应最明显,而p-AKT回补组和自噬抑制组较TSA处理组细胞生长曲线有部分回升。结论TSA可以通过抑制p-AKT/p-mTOR途径,促进自噬,进而抑制胃癌细胞的增殖。