大鼠SCN5A基因内含子1+204 bp～+757 bp转录调控功能分析

摘要

目的 克隆大鼠心肌SCN5A基因5'端调控区,检测目的片段在HEK293细胞中的转录活性.方法 扩增大鼠心肌SCN5A基因+204 bp～+757 bp、+204 bp～+385 bp和+204 bp～+329 bp片段,构建含目的片段的荧光素酶报告基因--pGL3-P0、pGL3-P1和pGL3-P2,比较HEK293细胞中荧光素酶活性,评价不同长度DNA片段的转录调控活性.结果 成功构建大鼠心肌SCN5A基因5'端3个片断的荧光素酶报告基因,HEK293细胞中pGL3-P1相对荧光素酶活性分别为pGL3-P0、pGL3-P2的4.3倍和2.8倍.结论 SCN5A基因内含子1目的片段在HEK293细胞中具有较强的转录调控活性;SCN5A基因+329 bp～+385 bp为正凋控区,软件分析MZF1、USF、C-ETs-1等因子能与这些正调控区域结合并可能参与SCN5A基因的表达调控.