HIV-1 C亚型密码子优化gp120基因重组腺病毒载体的构建及表达

摘要

目的构建含有HIV-1C亚型gp120基因重组腺病毒载体，并在293细胞中表达gp120蛋白。方法PCR扩增，获得HIV-1C亚型gp120片段，定向克隆人腺病毒转移载体pTrack-CMV，线性化后转化至含有腺病毒骨架载体pAd-easy-1的大肠埃希菌BJ5183，获得重组子prAd—gp120，PacI酶切纯化后转染293细胞，包装成复制缺陷型重组腺病毒vAd—gp120。结果经PCR、酶切及DNA测序，插入片段大小、方向正确，获得了具有感染力的vAd—gp120重组腺病毒；通过Western印迹检测，重组腺病毒在293细胞中表达出分子量为120kD的蛋白。结论成功构建了含有HIV-1C亚型gp120基因重组腺病毒载体，并获得该基因的表达。