人脂肪间充质干细胞与脐静脉内皮细胞共培养与丝素蛋白支架联合构建组织工程脂肪的体外研究

摘要

目的 探讨人脂肪间充质干细胞(hADSCs)与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养后,共培养体系与丝素蛋白支架联合构建组织工程脂肪的可行性.方法 从人体正常脂肪组织中提取hADCSs,培养并扩增,行成脂及成骨诱导鉴定hADCSs的多向分化特性;流式细胞术检测hADCSs表面分子CD34、CD44、CD45、CD90,检测HUVEC表面分子CD31及CD34;测定hADCSs与HUVEC增殖曲线,探讨共培养比例;将共培养体系种植于丝素蛋白支架后行电镜扫描;成脂诱导14d后,反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定成脂基因PPARγ-2的表达.结果 hADSCs可以向脂肪细胞及成骨细胞分化;流式细胞术检测hADSCs结果显示CD34(+)、CD44(+)、CD45(-)、CD90(-),检测HUVEC结果显示CD31(+)、CD34弱阳性;HUVEC增殖速度快于hADSCs,以HUVEC:hADSCs为1∶4比例接种于培养皿培养3d后,细胞融合时两者比例约为1∶1;共培养体系接种于丝素蛋白支架成脂诱导14d后,通过RT-PCR成功测定出PPARγ-2基因的表达.结论 hADSCs与HUVEC共培养,在体外可成功构建出组织工程脂肪.