冠心病患者心外膜脂肪组织和血浆中脂联素相关miR-371b-5p表达及其对脂肪细胞因子分泌的影响

摘要

目的 :探讨冠心病(CAD)患者心外膜脂肪组织(EAT)和血浆中脂联素(APN,又称ADIPOQ)相关差异表达miR-371b-5p对脂肪细胞因子APN、Kruppel样因子4(KLF4)、白细胞介素6(IL-6)和单核细胞因子趋化蛋白1(MCP-1)分泌的影响,阐明miR-371b-5p在CAD中的作用机制.方法:收集CAD(CAD组,n=34)和非CAD(non-CAD组,n=16)患者的EAT和血液标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测2组患者EAT和血浆中miR-371b-5p的表达水平.将诱导成功的3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照组(不做任何处理)、miR-371b-5p过表达组(转染miR-371b-5p模拟物)和miR-371b-5p抑制剂组(转染miR-371b-5p抑制剂).qRT-PCR法检测转染24 h后各组3T3-L1前脂肪细胞中APN、KLF4、IL-6和MCP-1 mRNA表达水平,并对miR-371b-5p进行生物信息学分析.结果:与non-CAD组比较,CAD组患者EAT和血浆中miR-371b-5p表达水平均升高(P<0.01).与空白对照组比较,miR-371b-5p过表达组3T3-L1前脂肪细胞中APN和KLF4 mRNA表达水平降低(P=0.043,P=0.045),IL-6和MCP-1 mRNA表达水平升高(P=0.037,P=0.041);miR-371b-5p抑制剂组3T3-L1前脂肪细胞中APN和KLF4 mRNA表达水平升高(P=0.025,P=0.027),IL-6和MCP-1 mRNA表达水平降低(P=0.039,P=0.041).miR-371b-5p预测靶基因富集于多个生物学功能及过程,KEGG通路主要富集于脂肪细胞因子等信号通路;蛋白互作,miR-371b-5p预测靶基因APN、瘦素(LEP)和AKT1编码蛋白位于互作网络中核心位置.结论:CAD患者EAT中过表达miR-371b-5p转染成熟的3T3-L1脂肪细胞后可使细胞的抗炎因子表达水平降低,炎性因子表达水平升高,miR-371b-5p有望成为CAD治疗的新靶点.