寡核苷酸YW002对人牙周膜干细胞增殖、周期、凋亡和早期成骨分化的影响

摘要

目的:探讨免疫刺激型寡核苷酸(ODN) YW002对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖、周期、凋亡和成骨分化的影响,阐明ODN YW002对hPDLSCs生物学性能的调控作用.方法:原代培养hPDLSCs至3～5代,将细胞分为空白对照组、免疫抑制型ODN MT01组和ODN YW002组,共培养1、2、3和5d后采用MTT法检测各组hPDLSCs的增殖活性,采用流式细胞术检测各组hPDLSCs的细胞周期和凋亡情况,采用磷酸苯二钠微板法检测各组hPDLSCs中碱性磷酸酶(ALP)活性.结果:与空白对照组比较,ODN YW002组在培养1和3d时hPDLSCs增殖活性升高(P＜0.01);培养5d时hPDLSCs细胞增殖活性升高,但差异无统计学意义(P＞0.05).与ODN MT01组比较,ODN YW002组培养1d时hPDLSCs增殖活性下降(P＜0.05);培养3和5d时细胞增殖活性升高,但差异无统计学意义(P＞0.05).与空白对照组和ODN MT01组比较,ODN YW002组培养1d时G0/G1期hPDLSCs百分比降低,但差异无统计学意义(P＞0.05);S期hPDLSCs百分比升高,但差异无统计学意义(P＞0.05).与空白对照组比较,ODN YW002组培养1d时hPDLSCs早期和晚期细胞凋亡率降低(P＜0.05);培养2d时早期和晚期细胞凋亡率降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).与ODN MT01组比较,ODN YW002组培养2d时hPDLSCs早期和晚期细胞凋亡率降低(P＜0.05).与空白对照组比较,培养1、3和5d时ODN YW002组hPDLSCs中ALP活性升高(P＜0.01);与ODN MT01组比较,ODN YW002组培养1和5d时hPDLSCs中A1P活性升高(P＜0.05),培养3d时ALP活性降低(P＜0.05).结论:ODN YW002可通过抑制细胞凋亡以促进hPDLSCs增殖,且诱导ALP活性升高,提示其有潜在的促hPDLSCs成骨分化功能.