人野生型抑癌基因PTEN/MMAC1的巢式PCR法克隆、测序及表达载体的构建

摘要

目的:克隆人野生型抑癌基因PTEN/MMAC1 cDNA序列并构建其表达载体.方法:利用RT-nested PCR法从正常人胎盘组织中扩增出约1 200 bp的DNA片段,与pUCm-T 载体连接,作全自动测序确证,并将其重组入pcDNA 3.1载体中,构建为表达质粒pcDNA- w P.结果:对PCR产物进行测序,序列基本正确.结论:利用RT-nested PCR法成功克隆了人野生型抑癌基因PTEN/MMAC1 cDNA序列并构建了表达质粒pcDNA-wP.