抗CD3单克隆抗体激活杀伤细胞高效扩增培养体系的建立及细胞毒活性检测

摘要

目的:建立从20mL外周血中高效扩增抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞(CD3AK)的培养体系,并进行体外细胞毒活性检测.方法:采用抗CD3单克隆抗体(Anti-CD3 mAb)激活人外周血单个核细胞(PBMC),在人重组白细胞介素2(rIL-2)的协同活化下,获得CD3AK.对CD3AK进行长期体外培养,进行增殖动力学、免疫表型和体外抗肿瘤活性的分析.结果:在培养第7～22天,CD3AK增殖倍数明显提高,最高可达317倍;免疫表型分析显示,CD3+细胞从活化前的51.9%增加至94.6%,CD4+细胞从19.5%增加至51.1%,CD8+细胞从22.1%增加至52.1%;效靶比20∶1组和40∶1组的杀伤肿瘤细胞活性明显高于10∶1组(P＜0.05和P＜0.01);在7～19 d的培养天数之内,杀伤肿瘤细胞活性最强.结论:从外周血中高效扩增的CD3AK是以CD3+、CD4+和CD8+细胞为主的异质性细胞群,在体外有明显的杀伤肿瘤细胞活性.