膜型基质金属蛋白酶-1增强乳腺癌细胞系MCF-7的恶性表型

摘要

目的:探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MTI-MMP)蛋白酶-1表达对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞生物学行为的影响及MTI-MMP催化亚单位在其中的作用.方法:应用脂质体转染法将携带MTI-MMP及其突变体基因MTI-MMP-E240A的pcDNA3.1载体分别稳定导入MCF-7细胞,通过超微结构观察及体外生长、迁移实验检测MCF-7细胞生物学行为的变化.结果:转染后的细胞经RT-PCR证实MTI-MMP mRNA的表达与对照组比较明显增强;免疫荧光细胞化学染色显示MTI-MMP蛋白呈强阳性表达,阳性颗粒分布于肿瘤细胞的胞浆和胞膜.透射电子显微镜观察显示pcDNA3.1组和MCF-7组细胞未见异常,而MTI-MMP组与MTI-MMPE240A组细胞与对照组相比出现较多处于分裂期的细胞和瘤巨细胞,部分细胞胞浆内出现糖原池和髓样小体样溶酶体.细胞增殖周期、细胞生长曲线测定结果显示,MTI-MMP组与MTI-MMP-E240A组处于G2M期的细胞比率明显高于对照组(P<0.01),提示转染组细胞的增殖能力增强.转染组细胞在Matrigel和FN上的迁移能力较对照组明显增强(P<0.05).结论:MTI-MMP能够促进肿瘤细胞的增殖、迁移,在一定程度上增加其恶性表型;MTI-MMP催化亚单位在其中不发挥主要作用.