20(S)-人参皂苷Rg3对乳腺癌MCF-7细胞的诱导凋亡作用

摘要

目的:探讨20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)对人乳腺癌MCF-7细胞的诱导凋亡作用及其可能机制.方法:人乳腺癌细胞MCF-7细胞株分为SPG-Rg3实验组及空白对照组.采用MTT法观察SPG-Rg3对MCF-7细胞生长的抑制作用,并计算出IC50,依据IC50值确定SPG-Rg3的有效浓度;流式细胞术检测SPG-Rg3作用后MCF-7细胞周期的变化;AO/EB双染从形态学上观察SPG-Rg3对MCF-7细胞凋亡的作用;免疫细胞化学染色和RT-PCR技术分别从蛋白水平和分子水平上检测SPG-Rg3对MCF-7细胞的诱导凋亡作用及其与caspase-8基因的关系.结果:SPG-Rg3 IC50为(155.70±0.71)mg·L-1,当SPG-Rg3浓度在37.5～600.0mg·L-1时,MCF-7细胞的生长抑制率随SPG-Rg3浓度的增加而增大,与对照组比较,细胞增殖受到明显抑制(P＜0.05);MCF-7细胞的生长周期也发生变化,S期细胞数增加,明显高于对照组(P＜0.01),G2/M期细胞数则明显少于对照组(P＜0.01);并且在G1峰前出现明显的凋亡峰,凋亡细胞数增加.形态学上观察到SPG-Rg3(150 mg·L-1)实验组细胞大部分核着黄色荧光或橘红色荧光,形态呈固缩状、圆珠状或新月形,呈现明显的凋亡改变;caspase-8免疫细胞化学染色可见,对照组MCF-7细胞caspase-8蛋白不表达,SPG-Rg3实验组则呈强表达,两组细胞HSCORE得分为1.894±0.027及2.869±0.043,两组比较差异有显著性(P＜0.01);提取细胞mRNA并设计caspase-8引物进行RT-PCR,SPG-Rg3实验组细胞caspase-8大量表达,对照组细胞无表达.结论:SPG-Rg3能诱导乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡,其机制可能与其活化caspase-8作用有关.