人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白激酶-2C端基因的克隆与鉴定

摘要

目的:获得人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白激酶-2(MASP-2)C端编码基因,并表达人MASP-2 C端片段,为制备单克隆抗体及应用于临床相关疾病的检测奠定分子学基础.方法:采用RT-PCR技术从人胎肝组织总RNA中扩增人MASP-2 C端的cDNA,克隆入pGEX-6p-2表达载体,酶切图谱分析和序列分析鉴定.结果:获得编码人MASP-2 C端片段的cDNA,并且与pGEX-6p-2载体连接,转化大肠杆菌XL1-blue,成功构建人MASP-2 C端片段cDNA的重组克隆.重组质粒酶切图谱分析和DNA测序分析,人MASP-2 C端片段cDNA的重组克隆与GenBank中人MASP-2 C端的cDNA序列一致.结论:成功克隆了人MASP-2 C端片段cDNA,并在大肠杆菌中表达人MASP-2 C端多肽片段.