变形链球菌耐氟菌株中耐酸相关基因gluA突变的检测及其意义

摘要

目的:检测变形链球菌耐氟菌株中耐酸相关基因gluA是否发生突变,阐明变形链球菌耐氟菌株耐酸性的变化.方法:采用变形链球菌国际参考株在体外人工诱导形成变形链球菌耐氟菌株,碱裂解法提取变形链球菌耐氟菌株的基因组,根据GenBank上发表的变形链球菌不同菌株中耐酸相关基因gluA的基因序列,在保守区设计上下游引物,以变形链球菌耐氟菌株的基因组为模板进行PCR扩增,挤胶法回收PCR产物,利用pMD18-T载体进行T/A克隆,构建重组质粒,进行酶切鉴定及测序.结果:变形链球菌耐氟菌株耐酸相关基因gluA的基因序列与GenBank报告的变形链球菌耐酸相关基因gluA序列经BLASTN比对完全相同,没有碱基发生突变.结论:变形链球菌耐氟菌株中耐酸相关基因gluA未发生突变,该基因对变形链球菌耐氟菌株的耐酸性没有影响.