维生素K3诱导氧化应激经ERK信号途径介导HeLa细胞发生自噬

摘要

目的:利用维生素K3(VK3)复制HeLa细胞氧化应激模型,探讨细胞外信号调节激酶(ERK)途径在氧化应激诱导自噬过程中的作用.方法:将人宫颈癌HeLa细胞随机分为对照组、VK3组(30 μmol·L-1)、U0126组(10 μmol·L-1)和VK3(30 μmol·L-1)+ U0126(10 μmol·L-1)组.MTT法检测各组细胞生存率;Western blotting法检测HeLa细胞中ERK1/2、磷酸化ERK1/2 (Phospho-ERK1/2)、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、凋亡相关蛋白caspase-3及其活化片段cleaved caspase-3的表达水平;Hoechest 33342染色激光共聚焦观察凋亡细胞核形态和细胞凋亡率.结果:与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞生存率降低(P＜0.05).VK3组作用2、4和8 h HeLa细胞中Phospho-ERK1/2表达水平增加(P＜0.05).与对照组比较,VK3组HeLa细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平增加(P＜0.05);与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低(P＜0.05),cleaved caspase-3蛋白表达水平增加(P＜0.05).与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞呈现凋亡细胞核形态,细胞凋亡率升高(P＜0.05).结论:氧化应激通过ERK信号途径诱导HeLa细胞发生自噬,被激活的细胞自噬能抑制VK3诱导HeLa细胞凋亡.