肝祖细胞移植对四氯化碳诱导急性肝衰竭小鼠模型肝损伤的修复作用

摘要

目的:观察肝祖细胞(HPCs)移植后不同浓度四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝衰竭小鼠模型肝脏修复情况,评价HPCs对肝损伤的修复能力,为评估HPCs移植疗效建立理想的肝衰竭模型.方法:96只ICR小鼠随机分为空白对照组、阴性对照组(0.1％ CCl4组、0.5％ CCl4组、2.0％ CCl4组、10.0％ CCl4组)和实验组(0.1％ CCl4+HPCs组、0.5％ CCl4+HPCs组、2.0％ CCl4+HPCs组和10.0％ CCl4+HPCs组).空白对照组小鼠灌胃给予生理盐水,阴性对照组和实验组小鼠灌胃给予不同剂量CCl4.CCl4造模后1d,将实验组和阴性对照组小鼠常规麻醉后切开腹腔,实验组小鼠经脾脏注射HPCs,阴性对照组小鼠注射等剂量无菌生理盐水.动态观察小鼠生命体征,监测其存活率;采血检测小鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性;取肝脏计算肝脏指数;HE染色观察各组小鼠肝脏组织病理学变化;Hoechst33342标记外源性HPCs,激光共聚焦显微镜检测移植HPCs在肝脏中的分布情况及肝脏标志蛋白细胞角蛋白18 (CK18)和白蛋白(ALB)的表达.结果:与空白对照组比较,0.1％和0.5％CCl4组小鼠存活率、肝脏指数、AST和ALT活性无明显变化(P＞0.05).病理学检测,肝细胞有自我修复作用,HPCs移植治疗的效果不明显.与2.0％CCl4组比较,2.0％CCl4+HPCs组小鼠AST和ALT活性及肝脏指数降低(P＜0.01),存活率增加(P＜0.01);病理学检测可见肝细胞再生和大量外源性肝细胞,CK18和ALB表达与内源性肝细胞相当,HPCs移植治疗有效.10.0％ CCl4组和10.0％ CCl4+HPCs组小鼠2d内全部死亡,无法评估HPCs的治疗效果.结论:HPCs移植可提高急性肝衰竭模型小鼠存活率,改善AST和ALT活性,对肝损伤具有较强的修复能力;且2.0％CCl4诱导的ICR小鼠急性肝衰竭模型能有效反映HPCs移植治疗的效果.