骨髓单核细胞和RAW264.7细胞诱导培养破骨细胞的条件研究

摘要

目的:研究骨髓单核细胞(BMMs)和RAW264.7细胞诱导培养破骨细胞(OC)的条件.方法:采用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)共同诱导骨髓单核细胞和RAW264.7细胞,2 d换液一次,镜下见大量体积较大的OC时行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定.结果:骨髓单核细胞和RAW264.7细胞加入M-CSF和RANKL诱导培养4 d后见体积较小的OC形成,5 d时体积增大,数量增多,7 d时数量减少.TRAP染色见大量体积较大的OC,核呈深染,细胞核数量可达数十个.结论:骨髓单核细胞和RAW264.7细胞在M-CSF(50ng/mL)、RANKL(100 ng/mL)的诱导培养下5 d可见体积大且TRAP染色阳性的成熟OC,RAW264.7细胞诱导形成的OC较多.