肿瘤成纤维细胞通过外泌体miR-21促进膀胱癌细胞侵袭转移

摘要

目的:探讨外泌体miR-21参与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)促进膀胱癌细胞侵袭转移的作用及机制.方法:利用组织块贴壁法分别从膀胱癌和癌旁组织分离CAF和正常成纤维细胞(normal fibroblast,NF),利用荧光实时定量PCR检测膀胱癌组织,CAF、NF和相应外泌体,以及外泌体共孵育的膀胱癌T24细胞中miR-21的相对表达.通过Transwell侵袭迁移实验检测CAF、CAF分泌的外泌体及miR-21对膀胱癌细胞侵袭迁移能力的影响.蛋白质印迹及荧光素酶实验明确miR-21的靶基因.结果:相较于癌旁组织,miR-21在膀胱癌组织,尤其是分期较晚的浸润性膀胱癌组织中高表达.CAF分泌的外泌体中miR-21的表达水平明显高于NF分泌的外泌体.与CAF、CAF分泌的外泌体孵育及转染miR-21,可显著增强T24细胞侵袭迁移的能力.进一步荧光素酶实验证实miR-21可靶向抑制同源性磷酸酶张力蛋白(PTEN)的表达.结论:CAF可释放高表达miR-21的外泌体,经膀胱癌细胞摄取后,通过靶向抑制PTEN,促进膀胱癌细胞侵袭转移的发生.