胃癌特异性DNA适体的筛选和鉴定

摘要

核酸适体是在疾病诊断和治疗领域出现的新一类分子探针.本实验采用全活体细胞SELEX技术富集胃癌细胞特异性适体,人胃癌AGS细胞、人正常胃表皮GES-1细胞分别作为正向选择的靶细胞和反向选择的阴性细胞,筛选过程为凝胶电泳和流式细胞分析所监测.通过连续的体外进化、克隆、测序,最终对胃癌细胞特异的DNA适体cy-apt20从ssDNA池中筛选出来,流式细胞分析结果提示其对AGS细胞有高于70%的结合率,对于非胃癌细胞的结合率则低于30%.少量的FITC-cy-apt20即可有效识别AGS细胞,并且稳定持续一段时间.荧光成像的结果表明多数AGS细胞可被FITC-cy-apt20染色,AGS细胞的荧光强度强度约为非AGS细胞的六倍.本研究表明全活体细胞SELEX技术是富集胃癌细胞特异性适体简便、有效的方法,cy-apt20适体在胃癌的诊断和研究中具有广阔的应用前景.