自噬基因WIPI2在人肝细胞癌索拉非尼耐药细胞株Huh7-SR中的表达及意义

摘要

cqvip:目的探讨自噬基因WIPI2在人肝细胞癌索拉非尼耐药细胞株Huh7-SR中的表达及意义。方法以人肝细胞癌Huh7细胞为亲本细胞,采用药物浓度梯度法建立人肝细胞癌索拉非尼耐药细胞株Huh7-SR;用蛋白质印迹法(Western blotting)检测WIPI2蛋白在Huh7细胞与Huh7-SR细胞中的表达情况;用siRNA转染法敲低Huh7-SR细胞中的WIPI2基因表达,用平板克隆实验检测Huh7-SR细胞对索拉非尼的敏感性改变。结果 WIPI2蛋白在耐药株Huh7-SR细胞中为高表达[蛋白相对表达值为(2.18±0.23)],明显高于其在Huh7细胞中的表达水平(1.02±0.07),二者差异具有统计学意义(P<0.05);在si-WIPI2转染后的Huh7-SR细胞中WIPI2蛋白表达水平降低(0.44±0.03),而si-NC转染后的Huh7-SR细胞中WIPI2蛋白仍为高表达(1.21±0.08);在索拉非尼的作用下,Huh7-SR的si-WIPI2转染组的细胞克隆数为(60±4)个,较si-NC转染组的细胞克隆数[(102±3)个]明显减少(P<0.05)。结论自噬基因WIPI2在人肝细胞癌耐药株Huh7-SR中的高表达对其耐药形成具有重要作用,敲低自噬基因WIPI2可恢复Huh7-SR细胞对索拉非尼的敏感性,这表明WIPI2有望成为肝细胞癌治疗的新的分子靶点。