导入FasL基因对荷肝癌裸鼠肿瘤增殖影响的实验研究

摘要

目的对PA317/FasL-pLXSN在裸小鼠体内抗肿瘤作用及机理作进一步探讨.方法制备PA317/pKXSN-FasL+病毒上清及转FasL CBRH7919细胞株.60只实验动物,随机分成4组.收集处于对数生长期的CBRH7919肝癌细胞,A、C、D三组每只裸小鼠接种肝癌细胞于腋窝皮下.A组(对照组):接种5天后,在腋窝部肿瘤内注射生理盐水;B组:接种FasL-CBRH7919制备模型;C组:实验方法同A组,在腋窝部肿瘤内注射PA317/pLXSN-FasL+病毒上清;D组:实验方法同C组,在腋窝部肿瘤内注射PA317/pLXSN空载体.肿瘤细胞接种后测量、计算肿瘤的体积;间接免疫荧光流式细胞仪(flowcytometer,FCM)检测各组肿瘤组织FasL的表达情况.采用PI-Annexin V方法,用FCM检则各组肿瘤细胞凋亡情况.结果观察时间为20天,B、C组肿瘤生长受到明显抑制,但并未完全消退,且与对照组有显著差异;D组肿瘤生长与对照组无显著差异.B、C组肿瘤组织中FasL表达显著高于A、D组(分别为72.3%,68.6% vs7.2%,11.3%,P＜0.01);与此对应,B、C组肿瘤组织中细胞凋亡显著高于A、D组(分别为30.5%,31.3% vs 12.1%,19.4,P＜0.01)结论采用逆转录病毒载体将FasL基因导入裸小鼠肝癌组织,可改变FasL在癌组织、癌周组织和正常组织表达的不均衡性,诱导Fas依赖性的肿瘤细胞凋亡,有效抑制肿瘤增殖.