Notch 1信号途径的激活及其对宫颈癌细胞凋亡的影响

摘要

目的探讨Notch1信号途径在宫颈癌细胞中的激活,并研究其对宫颈癌细胞凋亡的影响。方法扩增人胎盘组织细胞内的全长NICD,并构建pcDNA3.1-NICD真核表达载体。通过脂质体转染宫颈癌细胞,筛选稳定表达NICD的宫颈癌细胞株。通过RT-PCR及Western blotting检测Notch1和Hes1基因的表达,并通过流式细胞仪观察其对宫颈癌细胞凋亡的影响。结果未处理及转染pcDNA3.1和pcDNA3.1-NICD的Hela细胞中均存在Notch1及Hes1基因的表达,表明该信号通路在Hela细胞中处于激活状态。然而,转染NICD的宫颈癌细胞株Notch1及Hes1的表达明显升高,提示该通路可能在外源NICD的影响下处于过度激活状态。流式细胞仪检测结果显示,在未处理和转染pcDNA3.1的Hela细胞中,细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);但与未处理的和转染pcDNA3.1的Hela细胞相比,稳定表达NICD的Hela细胞的细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论外源的NICD通过Notch1信号途径能引起宫颈癌细胞的凋亡,提示Notch1可能成为治疗宫颈癌的分子靶点。