偏凸山羊草fastω-醇溶蛋白基因克隆及与WDEIA相关的IgE结合抗原表位分析

摘要

克隆偏凸山羊草中的fastω-醇溶蛋白基因,并对其序列和IgE结合抗原表位进行分析,以期了解IgE结合抗原表位在Dv和Mv基因组中的分布,并为制备单克隆抗体进行IgE结合抗原表位的定量分析奠定基础.结果表明,从偏凸山羊草中克隆获得8个fastω-醇溶蛋白基因(KY368672—KY368679),其中,3个fastω-醇溶蛋白(KY368672—KY368674)由Dv基因组编码,其余5个(KY368675—KY368679)由Mv基因组编码.序列分析发现,获得的fastω-醇溶蛋白与已发表的fastω-醇溶蛋白具有相似的序列结构,KY368672为SRQ型 ω-醇溶蛋白,KY368673和KY368674为TRQ型 ω-醇溶蛋白,KY368675—KY368679均为SRL型 ω-醇溶蛋白.另外,在Mv基因组编码的fastω-醇溶蛋白中,发现了与 α-醇溶蛋白相似的多聚谷氨酰胺序列.IgE结合抗原表位分析表明,Mv基因组编码的fastω-醇溶蛋白比Dv基因组编码的fastω-醇溶蛋含有更多的IgE结合抗原表位.