PEDV E蛋白对宿主细胞UPR反应关键蛋白GRP78表达的影响

摘要

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)能够引起仔猪的大量死亡,造成重大经济损失.PEDV E蛋白在病毒的出芽以及复制过程中起重要作用.将重组质粒pCMV-Myc-E与真核表达载体pCMV-Myc分别转染HEK-293T和PK15细胞系,验证PEDVE蛋白在宿主细胞的正确表达和亚细胞定位情况.同时验证未折叠蛋白反应(Unfold protein response,UPR)关键蛋白葡萄糖调节蛋白78(Glucose regulated protein of 78 KDa,GRP78)的表达情况.免疫荧光和Western Blot的结果表明,PEDV E蛋白在HEK-293T和PK15细胞中都得到正确表达,且定位于细胞质中.与对照组相比,重组质粒pCMV-Myc-E能够特异性引起GRP78蛋白表达量升高,且GRP78表达水平随E蛋白剂量与感染时间的增加而增强.以上结果表明,PEDV E蛋白能诱导UPR关键蛋白GRP78蛋白的表达,激活UPR反应.为后续研究PEDV E蛋白诱导UPR反应的分子机制提供参考.