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应用寡核苷酸探针膜杂交方法快速检测耐异烟肼结核分支杆菌基因型

     

摘要

目的应用寡核苷酸探针膜反向斑点杂交技术快速检测结核分支杆菌对异烟肼(isoniazid,INH)耐药性.方法设计与合成用于检测结核分支杆菌耐INH基因katG、inhA的寡核苷酸探针,点于硝酸纤维素膜上,与结核分支杆菌临床分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进行反向斑点杂交,并与PCR-单链构象多态性(Polymerase chain reaction-Single stranded conformation polymorphism,PCR-SSCP)和PCR-直接测序(PCR-direct sequencing,PCR-DS)结果比较.结果 20株INH敏感株中,仅9株出现野生型探针K1阳性杂交,余11株中,10株K1b'杂交阳性,PCR-DS显示katG基因315位密码子AGC→ACC,1株K1c'杂交阳性,PCR-DS显示katG基因315位密码子AGC→AAC;15株出现野生型探针inh1阳性杂交,另5株Inha1探针杂交阳性,PCR-DS显示inhA基因-15位C→T突变.36株耐药株中,17株K1探针杂交阳性,18株K1b'杂交阳性,1株与所试探针不杂交,PCR-DS显示katG基因279位密码子GGC→GAC;11株与突变型Inha1探针阳性杂交,25株与野生型探针inh1杂交阳性.katG基因膜杂交突变检出率为 50 %,inhA基因膜杂交突变检出率为 30.56 %.结论寡核苷酸探针膜杂交技术可能成为检测部分结核分支杆菌耐异烟肼基因型简便、快速的方法.

著录项

  • 来源
    《河北医科大学学报》|2006年第4期|241-245|共5页
  • 作者单位

    中国人民解放军总医院第309临床部结核病研究室,北京,100091;

    中国人民解放军总医院第309临床部结核病研究室,北京,100091;

    中国人民解放军总医院第309临床部结核病研究室,北京,100091;

    中国人民解放军总医院第309临床部结核病研究室,北京,100091;

    中国人民解放军总医院第309临床部结核病研究室,北京,100091;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R378.911;
  • 关键词

    分支杆菌,结核; 异烟肼; 药物耐受性;

  • 入库时间 2022-08-18 06:35:03

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