放射配基法测定大鼠海马μ-阿片受体的方法总结及优化

摘要

目的 建立一套安全、经济、可靠的实验条件.为检测大鼠海马μ阿片受体奠定方法学基础.方法 从膜蛋白提取、结合反应体系、孵育温度、孵育时间等方面,对放射配基结合分析的实验条件进行摸索;并从环保、经济的角度考虑,对实验进行了优化.结果 发现当蛋白浓度为1 mg/mL、[3H]DAMGO 0.5～8.0 nmol/L5个浓度点、非标记配基DAMGO浓度为5 μmol/L、4℃孵育过夜的条件下,结果稳定、可靠.结论 该方法经济、可靠、重复性好,且易于掌握、污染少.