猪卵泡液和胎牛血清对猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟的影响

摘要

本研究探讨了猪卵泡液(pFF)和胎牛血清(FCS)对猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟的影响.将猪小腔卵泡(直径＜2 mm)卵母细胞-卵丘复合体(COSs)以15～35枚为一组随机置于添加不同浓度(0、5%、10%、20%)pFF(试验一)或不同浓度(0、5%、10%、20%)FCS(试验二)的改良TCM-199成熟液中培养44～48 h,观察卵母细胞的核成熟率和卵丘扩散情况.试验一结果显示,成熟液中添加10%pFF与对照组和添加5%、20%pFF组相比,显著提高猪小腔卵泡卵母细胞的核成熟率(28.2%比20.5%、20.9%、22.3%;p＜0.05);添加5%和20%pFF组与对照组相比,它们的小腔卵泡卵母细胞核成熟率之间差异不显著(p＞0.05);添加5%pFF组的COCs卵丘细胞呈现第3类扩散,添加10%和20%pFF组的COCs卵丘细胞呈现第4类扩散,而不添加pFF的对照组的COCs卵丘细胞呈现第2类扩散.试验二结果显示,成熟液中添加10%FCS与对照组和添加5%、20%FCS组相比,明显提高猪小腔卵泡卵细胞的核成熟率(60.0%比37.5%、40.2%、43.9%;p＜0.05);添加5%和20%FCS组与对照组相比,它们的小腔卵泡卵细胞核成熟率之间差异不显著(p＜0.05);FCS在COCs体外成熟培养的前22～24 h促进了卵丘扩散(3个处理组的COCs卵丘细胞呈现第3类扩散,而对照组COCs的卵丘细胞呈现第2类扩散).研究结果表明:(1)成熟液中添加pFF可促使猪小腔卵泡卵母细胞周围的卵丘细胞扩散;(2)猪小腔卵泡卵母细胞核成熟率与其周围卵丘细胞的扩散程度无直接的因果关系;(3)成熟液中添加适量(10%)pFF或FCS可显著提高猪小腔卵泡卵母细胞核成熟率.