阿立塞替通过靶向Aurora激酶A提高人非小细胞肺癌细胞的放射敏感性

摘要

目的:探讨阿立塞替(MLN8237)对人非小细胞肺癌放射敏感性的影响及作用机制。方法:用siPORT NeoFX转染试剂将阴性siRNA、si Aurora Kinase A分别转染NCI-H1975细胞阴性对照组(Si control)及靶向Aurora激酶A组(si Aurora Kinase A),未转染siPORT NeoFX的NCI-H1975细胞作为单纯对照组(Control);CCK8实验检测抑制Aurora激酶A的抑制剂(MLN82370)对NCI-H1975细胞生长的影响,细胞凋亡实验检测抑制Aurora激酶A及加入MLN8237对NCI-H1975细胞凋亡的影响,克隆形成实验检测了MLN8237对NCI-H1975细胞放射敏感性的影响影响,qRT-PCR实验评估了NCI-H1975细胞中p16及p21的表达,荧光素酶分析实验测定细胞周期相关转录因子(E2F)和应激活化蛋白激酶(JNK)的活性。结果:NCI-H1975细胞的转染效率达89.91%,抑制Aurora激酶A及加入MLN8237可明显抑制NCI-H1975细胞的生长,差异有统计学意义(P<0.01);细胞凋亡实验结果显示,抑制Aurora激酶A及加入MLN8237可明显提高NCI-H1975细胞的凋亡率;克隆形成实验显示,MLN8237能够显著降低照射后NCI-H1975细胞的克隆形成能力对NCI-H1975细胞有放射增敏效果,且随剂量增大其增敏效果越显著;qRT-PCR结果显示,加入MLN8237(Aurora激酶A抑制剂)照射后,p16及p21的表达明显上调;荧光素酶分析实验结果显示,抑制Aurora激酶A显著降低了E2F的活性,而JNK的活性显著提高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:阿立塞替能通过靶向Aurora激酶A,而抑制NCI-H1975细胞增殖及诱导其凋亡,从而提高NCI-H1975细胞的放射敏感性。