成体大鼠的骨髓间充质干细胞分离和体外培养的初步研究

摘要

目的:探索成体大鼠的骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、体外培养,为其应用提供实验依据.方法:无菌条件下抽取大鼠股骨骨髓,Percoll梯度分离液离心分离,在含12%新生牛血清的DMEM中,37 C、5%CO2、饱和湿度下常规培养,对分离的细胞行碱性磷酸酶(AKP)的检测.结果:取得较高纯度的成体大鼠骨髓MSCs,并保持细胞的活性;成体大鼠骨髓MSCs在体外培养中,为贴壁生长的单个核球形细胞,培养3～4 d后开始大量增殖,并形成形态均一的细胞增殖集落.对分离后所获细胞进行AKP染色为强阳性.结论:采用Percoll梯度分离液进行离心分离,可获较高纯度的MSCs,是实用、便捷和可行的方法;而且在体外培养的条件下能大量增殖,形成形态均一的细胞集落,可以成为进一步进行细胞扩增或其它实际应用的基础.