布比卡因通过调节AMPK对人膀胱癌T24细胞恶性增殖、氧化应激及凋亡的影响

摘要

目的 探讨布比卡因对人膀胱癌T24细胞增殖、氧化应激和凋亡的影响.方法 选择不同剂量的布比卡因处理人膀胱癌T24细胞,24 h后CCK8检测细胞存活率.选择无显著毒性剂量分别为0、1.25、2.5、5 mmol/L的布比卡因进行后续实验.克隆形成实验检测细胞增殖;RT-PCR检测增殖标记物的mRNA水平;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测细胞SOD活性和MDA、GSH的含量;蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白和AMPKα1、Ki67和Caspase-3的表达.结果 T24细胞的存活率以布比卡因浓度依赖的方式降低,布比卡因浓度超过10 mmol/L时,T24细胞的存活率显著降低(P<0.05).与布比卡因0 mmol/L组比较,布比卡因2.5 mmol/L组和布比卡因5 mmol/L组T24细胞克隆形成率、Ki67和Survivin mRNA表达、SOD活性和GSH含量均显著降低(P<0.05);细胞凋亡率、MDA含量、AMPKα1蛋白表达水平、Cleaved Caspase-3/Caspase-3和Bax/Bcl-2的蛋白表达比值均显著升高(P<0.05).5 mmol/L布比卡因组细胞引入抑制剂Compound C后,SOD活性和Ki67蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),AMPKα1蛋白表达水平和Cleaved Caspase-3/Caspase-3比值均显著升高(P<0.05).结论 布比卡因可通过上调AMPK水平抑制人膀胱癌T24细胞恶性增殖并诱导细胞氧化应激和凋亡.